免疫细胞无血清培养基可用于脐带血或外周血中分离到的单核细胞向CIK细胞(细胞因子诱导的杀伤细胞)的体外诱导及体外大规模扩增培养。
免疫细胞无血清培养基使用方法
1、采集与分离外周血采集外周血,Ficoll密度梯度离心分离收集单个核细胞。
2、单个核细胞的接种与诱导活化
1) 0d时,绷胞计数。按细胞密度2x106cell/mL接种至对应体积的培养液中。添加诱导因子YC001一支。添加10%比例的自体血浆。
2) 1d时(24小时),添加诱导因子YC002、YC003、YC004至已经接种细胞的培养液中。将YC005添加至未经使用的培养基中,待用。
3、细胞的连续培养与扩增
1) 3d时,补入新鲜培养液,调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同时添加新加入培养液体积l10%比例的自体血浆。补液比例大致在1:2左右(原有培养液体积:新加培养液体积)
2) 5d时,补入新鲜培养液,调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。补液比例大致在1:3左右。
3) 7d时,补入新鲜培养液,调整细胞密度至(06-08)x106cell/mL。补液比例大致在1:2左右。
4) 9d时,将剩余培养液全部加入。
主要特点
1、无血清、不含异源动物成分;所有成分都是明确的,且同种来源(人),包括蛋白质;不含抗生素;
2、能够培养人淋巴细胞、CIK、DC、NK等各类免疫细胞;
3、具有很高的成活率和扩增倍数;
4、能够维持高密度培养;
5、具有很高的杀伤活性。
注意事项
1、如果观察培养基种有可见的沉淀物,不能再使用;
2、超过标签上的截止使用日期,不得再使用;
3、所有组分均应避光保存;
5、本产品请于阴凉干燥处避光保存,保存条件:2-8℃,避免反复冻融。拆封后请于2周内用完。